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小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse EyePrimaCell: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】
     小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道。其中，視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性。小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的視網(wǎng)膜組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的視網(wǎng)膜組織能使得視網(wǎng)膜組織中色素上皮細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將色素上皮細胞分離開來。。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的視網(wǎng)膜色素上皮細胞。

本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織洗液（5 x 00 ml） （5）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 00ml） （7）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織預(yù)備液（ x 00 ml） （8）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

人腦靜脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基00mL

佛羅里達側(cè)耳 Pleurotus florida

小鼠垂體瘤細胞英文名稱：

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

運動發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis

His標簽蛋白裂解液20 ug

中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

香菇 Lentinula edodes

人胰腺氟耐藥英文名稱：

人腺上皮細胞*培養(yǎng)基00mL

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書7-氟-2-甲喹啉分子式：6.8英文名稱：7- -2- methyl group：28-74-分子量： C0H8FN

鹽酸吖分子式：5.56英文名稱：Acridine hydrochloride：7784-47-3分子量： C3H9N·HCl

5-溴-2-甲-3-硝吡分子式：27.02英文名稱：5- -2- -3- nitro pyridine：9434-05-4分子量： C6H5BrN2O2

2-溴-3-氯-5-三氟甲吡分子式：260.44英文名稱：2- -3- three f：75806-84-7分子量： C6H2BrClF3N

聚乙英文名稱：PE分子式：分子量： [C2H4]n：9002-88-4

糖精鈉英文名稱：Saccharin sodium分子式：205.7分子量： C7H4NNaO3S·xH2O：82385-42-0

3-氯--丙英文名稱：3- --分子式：94.54分子量： C3H7ClO：627-30-5

小白菊內(nèi)酯英文名稱：White Chrysanthemum分子式：248.32分子量：C5H20O3：20554-84-

2-溴嘧分子式：58.98英文名稱：2- bromide：4595-60-2分子量： C4H3BrN2

4,4'-二甲聯(lián)甲酰分子式：英文名稱：4,4'- two methyl group：分子量：

注意事項：
. 接收到小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。