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豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

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豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存 詳細(xì)資料

豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可向客服索取說(shuō)明書(shū)》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱(chēng):豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱(chēng): MUC ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類(lèi)型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測(cè)抗體、
(四)競(jìng)爭(zhēng)法。
豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。

RIP2    重組人 CRIP2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)    FastDigest® AccI (XmiI)
ASFB    重組人 ASFB 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® NmuCI
MAPLC3A    重組人 LC3A / MAPLC3A 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® NaeI (PdiI)
NAA0    重組人 NAA0 / ARDA 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)    FastDigest® PdmI
GSTZ    重組人 GSTZ 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® PsuI
AIF    重組人 IBA / AIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® AvrII (XmaJI)
GNAZ    重組人 PFK / PFKM 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)    FastDigest® Hpy8I
PRTFDC    重組人 PRTFDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® AleI (OliI)
DPEP2    重組人 DPEP2 / MBD-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® Fnu4HI (SatI)
BPHL    重組人 BPHL 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® TauI
DPEP    重組人 Dehydropeptidase-I / DPEP 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® FspAI
PGC    重組人 Pepsinogen C / PGC 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® DpnI
TGFBR    重組人 TGFBR / ALK-5 / SKR4 蛋白 (aa 200-503, His & GST 標(biāo)簽)    FastDigest® DpnI
USP30    重組人 Ubiquitin specific peptidase 30 / USP30 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)    FastDigest® BsaBI (BseJI)核酸外切酶 III    2500U    
20895-200    大鼠白細(xì)胞分離液 .084    200mL
40449-50    柱式微生物基因組 DNAout     50 次
Rosetta-gami B(DE3)plysS 菌種    mL    
成骨細(xì)胞生長(zhǎng)因子    5mL    
T4 DNA 連接酶    000U    
豬粘蛋白/粘液素(MUC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存人胰島細(xì)胞分離液 .056    200mL  
8-0280-00    過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒    00 次
9037-30    一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝    30 次
三合一 RNA 上樣液 ( 含 EB)     .5mL    
DNA 非變性 PAGE 上樣液    .5mL    
柱式 DNA PAGE 膠回收試劑盒    50 次    
AH09 酵母菌種    mL    
3068-300    T7 DNA 聚合酶 ( 未修飾 )    300U

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