人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;293T-GFP

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗，不做其他科學(xué)實驗外的使用！

商品詳情：

細(xì)胞別稱；293T-GFP；人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記；人胚腎細(xì)胞-GFP

種屬來源；人

組織來源；腎

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；Luciferase 293T細(xì)胞穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白標(biāo)記。可用作綠色熒光蛋白標(biāo)記活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。293細(xì)胞株插入SV40 T-抗原的溫度敏感基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株稱為293T。

STR位點；Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:12,14；D16S539:9

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項 ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠胃動蛋白2(GKN2)檢測試劑盒 ，英文名： GKN2 ELISA Kit

Mouse aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白3(AQP-3)檢測試劑盒

MouseomeinELISAKit 小鼠網(wǎng)膜素(omein)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhs-CRP(MousehighsensitivityC-ReactiveProtein)ELISAKit小鼠超敏C反應(yīng)蛋白

細(xì)胞NADP依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NADP-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NADP-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitβ-TG大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

IL2RB重組小鼠 CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 蛋白 Protein

基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)

CALCB重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GRK5 Protein Human 重組人 GRK5 / GPRK5 蛋白

FUT8 Protein Hamster 重組倉鼠 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標(biāo)簽)

基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)

GRK5 Protein Human 重組人 GRK5 / GPRK5 蛋白

IL2RB重組小鼠 CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 蛋白 Protein

FUT8 Protein Hamster 重組倉鼠 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 標(biāo)簽)

CALCB重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;293T-GFP小鼠β酚(β-naphthol)LISA 試劑盒 96T/48T

Human vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 人B12(VB12)檢測試劑盒

Humanai-cailage-aibodyELISAKit 人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCenomereProtein,CENP-B檢測試劑盒人著絲粒蛋白B(CENP-B)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米MON809品系試劑盒20次

HumanSerumamyloidA，SAAELISAKit人血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(rabbit NE)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔神經(jīng)生長因子(rabbit NGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔神經(jīng)營養(yǎng)素3(rabbit -3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝